LEVEL 04

Fondements des milieux

Cette leçon explique le concept dans le contexte de la culture de tissus végétaux et montre pourquoi il doit rester lié à l’identité de la plante, à l’explant, au stade et au protocole.

01

Ce que fait le milieu culturel

Le milieu de culture fournit un environnement chimique contrôlé qui peut comprendre des nutriments minéraux, une source de carbone, des vitamines ou des suppléments organiques, des régulateurs de croissance des plantes, de l'eau et, lorsqu'un système solide ou semi-solide est utilisé, un agent gélifiant. La composition est choisie pour le matériel végétal et l'objectif de développement.

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02

Eau et sels basaux

L'eau est la composante la plus importante par volume, tandis que les formulations basales fournissent des macro- et des micronutriments dans des proportions définies. Parmi les formulations courantes figurent Murashige et Skoog ( MS ), Gamborg B5, Woody Plant Medium ( WPM ), et d'autres.

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03

Vitamines et glucides

Les cultures in vitro peuvent recevoir des vitamines et une source de glucides parce que leur capacité photosynthétique et leur environnement de culture peuvent ne pas soutenir la croissance entièrement autotrophique. Le saccharose est couramment utilisé dans de nombreux protocoles, mais les quantités exactes sont propres au protocole.

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04

Agents gélifiants

L'agar, les produits de type gellan et d'autres systèmes de gel peuvent créer un support semi-solide. La résistance au gel et la chimie influencent la disponibilité en eau, la diffusion, la manipulation et parfois la morphologie de culture, de sorte que l'agent gélifiant est une partie significative d'un protocole.

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05

Le pH en tant que concept

Le pH décrit l'activité hydrogène-ion et influence la chimie des nutriments, le comportement des gels et les conditions de culture des plantes. Les protocoles de culture des tissus spécifient souvent une plage de pH cible avant la stérilisation ou la préparation finale, mais la valeur exacte appartient au protocole examiné plutôt qu'une règle universelle.

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06

MS et WPM

Le milieu de Murashige et de Skoog ( MS ) est largement utilisé et relativement élevé dans les sels minéraux totaux; le milieu des plantes ligneuses ( WPM ) a été développé pour la culture des plantes ligneuses et diffère considérablement dans la composition des nutriments. Aucun nom ne vous dit que le support est automatiquement correct pour votre plante exacte.

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07

Aperçu des régulateurs de croissance des plantes

Les régulateurs de croissance des plantes ( PGRs ) sont des composés utilisés en culture pour influencer les réactions au développement. Les auxines et les cytokinines sont particulièrement importantes dans de nombreux systèmes d'organogenèse et de micropropagation, mais les gibberellines, les traitements liés à l'acide abscisique, les effets liés à l'éthylène et d'autres régulateurs peuvent aussi être importants.

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08

Concepts d'auxine et de cytokinine

Des expériences de culture tissulaire classique ont montré que le changement de l'équilibre de l'auxine et de la cytokinine peut fortement influer sur le développement d'organes. Ce modèle historique est fondamental, mais la biologie moderne de la régénération est plus complexe qu'une simple règle de ratio élevé/basse.

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09

Pourquoi la concentration et l'importance du contexte

Une concentration n'a de sens que lorsque l'identité chimique, les unités, la préparation de solution mère, le volume final, le matériel végétal, l'étape et le protocole sont connus. Une petite erreur unitaire peut modifier le traitement prévu par ordre de grandeur.

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CHECKPOINT

Évaluation du niveau

9 questions ; la révision et les explications apparaissent après l’envoi.

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