LEVEL 04

Fundamentos dos meios

Esta aula explica o conceito no contexto da cultura de tecidos vegetais e mostra por que ele deve permanecer ligado à identidade da planta, ao explante, ao estágio e ao protocolo.

01

O que o meio de cultura faz

O meio de cultura fornece um ambiente químico controlado que pode incluir nutrientes minerais, uma fonte de carbono, vitaminas ou suplementos orgânicos, reguladores de crescimento de plantas, água e – quando um sistema sólido ou semi-sólido é usado – um agente gelificante. A composição é selecionada para o material vegetal e o objetivo de desenvolvimento.

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02

Água e sais basais

A água é o maior componente por volume, enquanto as formulações basais fornecem macro- e micronutrientes em proporções definidas. As formulações comuns incluem Murashige e Skoog ( MS ), Gamborg B5, Woody Plant Medium ( WPM ), e outras.

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03

Vitaminas e hidratos de carbono

As culturas in vitro podem receber vitaminas e uma fonte de carboidratos porque sua capacidade fotossintética e ambiente de cultura podem não suportar o crescimento totalmente autotrófico. O sacarose é comumente usado em muitos protocolos, mas as quantidades exatas são específicas do protocolo.

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04

Agentes gelificantes

Agar, produtos do tipo gellan e outros sistemas de gelagem podem criar suporte semi-sólido. A resistência ao gel e a química influenciam a disponibilidade de água, a difusão, o manuseio e, às vezes, a morfologia da cultura, pelo que o agente gelante é uma parte significativa de um protocolo.

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05

pH como conceito

O pH descreve a atividade do ion-hidrógeno e influencia a química dos nutrientes, o comportamento do gel e as condições de cultura das plantas. Os protocolos de cultura tecidual muitas vezes especificam um intervalo de pH alvo antes da esterilização ou preparação final, mas o valor exato pertence ao protocolo revisado em vez de uma regra universal.

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06

MS e WPM

Murashige e Skoog ( MS ) meio é amplamente utilizado e relativamente alto em sais minerais totais; Woody Plant Medium ( WPM ) foi desenvolvido para cultivo de plantas lenhosas e difere substancialmente na composição de nutrientes. Nenhum nome lhe diz que o meio é automaticamente correto para a sua planta exata.

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07

Visão geral dos reguladores do crescimento das plantas

Os reguladores de crescimento das plantas ( PGRs ) são compostos utilizados na cultura para influenciar as respostas ao desenvolvimento. As auxinas e citoquininas são especialmente importantes em muitos sistemas de organogênese e micropropagação, mas gibberelinas, tratamentos relacionados ao ácido abscisico, efeitos relacionados ao etileno e outros reguladores também podem importar.

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Conceitos de Auxina e citoquinina

Experiências clássicas de cultura tecidual mostraram que a alteração do equilíbrio da auxina e da citoquinina pode influenciar fortemente o desenvolvimento de órgãos. Esse modelo histórico é fundacional, mas a biologia moderna de regeneração é mais complexa do que uma simples regra de proporção alta/baixo.

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09

Por que a concentração e a matéria do contexto

Uma concentração só tem significado quando a identidade química, unidades, preparação de solução estoque, volume final, material vegetal, estágio e protocolo são conhecidos. Um pequeno erro de unidade pode alterar o tratamento pretendido por ordem de magnitude.

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CHECKPOINT

Avaliação do nível

9 questões; a revisão e as explicações aparecem após o envio.

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